Phát triển và xác nhận w88club com w88 pháp xét nghiệm Buparvaquone

Tóm tắt

Theileria Orientalis là một loại động vật nguyên sinh lây truyền qua đường máu, lây nhiễm cho gia súc và được biết là xuất hiện ở Úc (chủ yếu ở Queensland) trong hơn một thế kỷ. Nhiễm trùng này được gọi là bệnh Theileriosis lành tính và hiếm khi gây ra các dấu hiệu lâm sàng ở động vật bị nhiễm bệnh. Trong khoảng thập kỷ qua, gia súc ở vùng biển phía đông Australia đã mắc bệnh, có dấu hiệu thiếu máu, vàng da, trầm cảm, suy nhược, sảy thai và tử vong. Họ đã được chẩn đoán là bị nhiễm vi khuẩn T Orientalis, loại vi khuẩn này hiện được biết có ít nhất ba phân nhóm ở Úc, một trong số đó luôn được tìm thấy trong các trường hợp lâm sàng. Căn bệnh này được đặt tên là Bệnh thiếu máu ở bò do vi khuẩn T Orientalis gây ra và từ đó người ta phát hiện bệnh này xảy ra ở gia súc ở Victoria và Tây Úc.

Không có w88club com w88 thuốc nào được đăng ký để điều trị căn bệnh này ở Úc. Buparvaquone (BPQ) đã được đăng ký ở nơi khác trên thế giới và được phát hiện là có hiệu quả chống nhiễm trùng do hai chủng phân lập ở bê đã cắt lách. Các bác sĩ thú y có thể nộp đơn lên Cơ quan Thuốc trừ sâu và Thuốc thú y Úc (APVMA) để được đồng ý nhập khẩu w88club com w88 thuốc điều trị cho bệnh nhân do họ chăm sóc, nhưng sau đó họ sẽ chịu trách nhiệm về bất kỳ dư lượng nào được tìm thấy trong các mô ăn được từ những động vật đó. Hiện tại không có thông tin nào mà bác sĩ thú y có thể đưa ra khuyến nghị về thời gian cách ly thích hợp (WHP) để tránh dư lượng vi phạm trong gia súc được xử lý BPQ được giết mổ để tiêu thụ cho người. Trước khi tiến hành nghiên cứu sự suy giảm dư lượng mô để làm cơ sở cho các khuyến nghị của WHP, một w88club com w88 pháp phân tích dư lượng BPQ trong mô ăn được phải được phát triển vì w88club com w88 pháp được sử dụng trước đây không sẵn có và được coi là đã sử dụng công nghệ lỗi thời.

Nguyên tắc của w88club com w88 pháp là dư lượng BPQ được chiết xuất từ ​​mô bò bằng acetonitril/acetone (80:20). Một phần dịch chiết được loại bỏ và làm sạch bằng w88club com w88 pháp chiết pha rắn (SPE) và dư lượng BPQ được xác định bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (HPLC), kết hợp với phép đo khối phổ song song (MS) (HPLC/MS/MS) (giám sát nhiều phản ứng – MRM). Dư lượng BPQ được chiết ra khỏi sữa bằng cách khuấy mẫu bằng acetonitril/acetone. NaCl, MgSO4 và các muối chọn lọc khác được thêm vào dịch chiết để tạo ra sự phân chia giữa acetonitril/acetone và nước. Một lượng nhỏ lớp axetonitril/axeton được lấy và pha loãng và dư lượng BPQ được xác định bằng HPLC/MS/MS (MRM).

Một loạt dung dịch chuẩn tham chiếu bên ngoài phù hợp với ma trận của BPQ đã được chuẩn bị: dung dịch chuẩn gốc chứa 1.000 mg/L trong axeton, ba chất chuẩn trung gian chứa 0,1, 1 và 10 mg/L trong axeton và các chất chuẩn định lượng trong ma trận kiểm soát chưa được xử lý của cơ, mỡ, gan, thận (tăng vọt đến nồng độ từ 0,2 đến 0,0025 mg/kg) và sữa (0,1 đến 0,002 mg/kg) để tạo đường chuẩn.

Chuẩn bị mẫu bao gồm việc cân 5g mô cho vào bình 250mL, (thêm chất chuẩn đối chiếu để kiểm soát nền mẫu nhằm thêm chuẩn định lượng), thêm 50mL acetonitril/acetone, đồng nhất hóa, trộn và ly tâm trước khi làm sạch SPE.

Phân tích LC/MS/MS được thực hiện trên Hệ thống ACQUITY UPLC (Waters) với Máy trạm Xevo TQ-S MassLynx 4.1 XP trong cột BEH C18 1,7 μm 50 x 2,1 mm (Waters). Việc định lượng và nhận dạng được thực hiện bằng cách so sánh với các chất chuẩn bên ngoài phù hợp với ma trận bằng cách sử dụng diện tích pic so sánh. w88club com w88 trình hồi quy tuyến tính được tạo ra cho các chất chuẩn hiệu chuẩn chất phân tích với trọng số 1/x sử dụng nồng độ của chất phân tích (trục X) so với diện tích pic của chất phân tích (trục Y), không bao gồm gốc tọa độ. Nồng độ của chất phân tích trong dịch chiết cuối cùng được xác định bằng cách thay thế phản ứng diện tích pic vào w88club com w88 trình hồi quy tuyến tính.

Đảm bảo chất lượng cho w88club com w88 pháp này bao gồm số lần thu hồi (mẫu đối chứng chưa được xử lý được củng cố bằng BPQ). Quá trình thu hồi được thực hiện đồng thời với mỗi lô mẫu thử. Độ thu hồi trung bình phải nằm trong khoảng từ 70% đến 110% với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) < 20% có thể chấp nhận được. w88club com w88 pháp phân tích đã được xác thực bằng cách sử dụng các tham số sau: độ tuyến tính, độ chính xác của hệ thống, độ chính xác và độ chính xác.

Có thể dự đoán rằng w88club com w88 pháp này có thể được sử dụng để xác định dư lượng BPQ trong các mô của gia súc đã được xử lý, ví dụ: để xác định kiểu suy giảm cặn mô để thiết lập thời gian giữ lại (WHP) cho gia súc đã được xử lý để giết mổ làm thực phẩm cho con người. Điều này sẽ mang lại lợi ích cho các bác sĩ thú y muốn điều trị gia súc bị nhiễm vi khuẩn T Orientalis và đề xuất một WHP thích hợp, cũng như chủ sở hữu của những gia súc đó, những người có thể phải chịu tổn thất về gia súc chưa được điều trị hoặc phải ngăn gia súc đã được xử lý xâm nhập vào chuỗi thức ăn của con người.