Tóm tắt
Nền
Việc chẩn đoán w88.is Johne ở buồng trứng vẫn còn là một vấn đề vì cho đến gần đây có rất ít nghiên cứu cơ bản được thực hiện ở bất kỳ đâu trên thế giới và hầu hết kiến thức hiện nay đều dựa trên nghiên cứu về w88.is lao ở người từ đầu những năm 1900. Các ứng dụng thực tế của điều này bao gồm các xét nghiệm được sử dụng ngày nay: nuôi cấy, mô w88.is học và xét nghiệm da trong da, hiện tại không có xét nghiệm nào rất nhạy cảm. Việc thiếu kiến thức cơ bản đã hạn chế nghiêm trọng việc phát triển các xét nghiệm chẩn đoán và vắc xin mới. Vì vậy, dự án này bao gồm các thành phần của nghiên cứu cơ bản cũng như nghiên cứu chuyển giao nhằm cung cấp các công cụ thiết thực cho ngành công nghiệp trong thời gian tới. Dự án này được thiết kế để sử dụng nghiên cứu cơ bản và kết hợp nó với các yếu tố chiến lược để khám phá các lựa chọn thử nghiệm mới và cải thiện các thử nghiệm hiện có. Dự án sử dụng các phương pháp tiên tiến về vi sinh, miễn dịch học, sinh học phân tử và gen trong một nhóm đa ngành với sự hợp tác quốc tế để đạt được mục tiêu của dự án.
Các kết quả chính Nhờ dự án, giờ đây người ta biết rằng:
xét nghiệm gamma interferon có thể được cải tiến để sử dụng trên cừu ở Úc
có thể xét nghiệm phân nhanh chóng và chính xác bằng phương pháp PCR trực tiếp
có thể tái tạo w88.is ở dạng tự nhiên trong điều kiện thí nghiệm có kiểm soát, mở ra các lựa chọn để đánh giá xét nghiệm, phát triển vắc xin và các nghiên cứu khác
có sẵn các kháng nguyên mới để đánh giá nhằm cải thiện độ đặc hiệu và độ nhạy của xét nghiệm
các xét nghiệm dựa trên cytokine mới có vẻ hữu ích
Sự ức chế miễn dịch và giảm cân trong w88.is Johne ở trứng có thể được giải thích bằng sự rối loạn điều hòa chuyển hóa axit amin. Việc phát hiện sinh vật trong máu không phải là một phương pháp chẩn đoán hữu ích
xét nghiệm máu dựa trên sự tăng sinh tế bào có thể dự đoán khả năng mắc w88.is ở cừu
Mục tiêu xa hơn của dự án là đảm bảo rằng có một nhóm các nhà nghiên cứu đáng tin cậy sẵn sàng hỗ trợ các nhà chăn nuôi cừu Úc và điều này cũng đã đạt được. Một số phát hiện của dự án này đã được công bố và nhóm dự án đã có danh tiếng quốc tế. Nhờ kết quả của dự án, giờ đây rõ ràng là hai xét nghiệm chẩn đoán hiện có vốn có những hạn chế nghiêm trọng về mặt thực tế và kỹ thuật có thể được cải thiện và có thể mang lại lợi ích đáng kể trong tương lai gần. Chúng bao gồm xét nghiệm PCR phân trực tiếp có thể cung cấp kết quả cho người chăn nuôi trong vòng vài ngày thay vì 3 tháng như hiện nay đối với nuôi cấy và xét nghiệm máu gamma interferon có thể được áp dụng thực tế để sử dụng trên cừu ở Úc.
Ngoài những thử nghiệm này, còn có một số xét nghiệm chức năng miễn dịch ở cấp độ nghiên cứu mới cần được phát triển thêm. Sau đây là thông tin thêm về hai bài kiểm tra hứa hẹn nhất. Xét nghiệm PCR phân trực tiếp Xét nghiệm PCR phân trực tiếp là một bước đột phá đối với ngành chăn nuôi cừu. Trước đây, các mẫu phân được thu thập, gửi đến phòng thí nghiệm và phải mất 3 tháng mới có thể xác nhận kết quả xét nghiệm âm tính. Đối với việc bán cừu, điều này có nghĩa là phải lập kế hoạch trước đáng kể và gây bất tiện lớn cho nhà sản xuất. Ở những nơi nuôi cấy được sử dụng để xác nhận đàn bị nghi ngờ nhiễm w88.is, sự chậm trễ kéo dài đã gây thêm lo lắng đáng kể cho người sản xuất.
Thử nghiệm mới khắc phục được những vấn đề này vì nó có thể cho kết quả trong vòng vài ngày kể từ khi nhận được mẫu tại phòng thí nghiệm. Nó sẽ không tốn nhiều chi phí hơn văn hóa và sẽ có độ chính xác tương tự. Trong số 65 mẫu nuôi cấy dương tính, 62 mẫu dương tính trong xét nghiệm mới. Trong số 140 mẫu nuôi cấy âm tính, có 12 mẫu dương tính trong xét nghiệm mới. Vì không có mẫu nào từ các đàn được biết là không có OJD được xét nghiệm dương tính trong cả hai xét nghiệm, chúng tôi tin rằng xét nghiệm phân mới nhạy hơn một chút so với xét nghiệm nuôi cấy. Hơn nữa, nó phù hợp để kiểm tra các mẫu phân gộp, cho phép thực hiện một phương pháp xét nghiệm đàn rẻ tiền, để phát hiện sự lây nhiễm hoặc để chứng minh rằng nó không hiện diện trong đàn trong Chương trình Đảm bảo Thị trường.
Nhóm cố vấn nghiên cứu JD đã đề xuất xác nhận bổ sung cho xét nghiệm này, sau đó dữ liệu sẽ được gửi tới Tiểu ban về Tiêu chuẩn phòng thí nghiệm thú y (SCAHLS) để phê duyệt sử dụng trong Chương trình w88.is Johne quốc gia. Việc đệ trình xét nghiệm sẽ được gửi tới SCAHLS vào năm 2011. Xét nghiệm gamma interferon máu toàn phần Một xét nghiệm gamma interferon máu toàn phần đã được phát triển đến giai đoạn nguyên mẫu trong dự án trước đó đã được sửa đổi và cải tiến trong dự án này. Trước đây cần phải gửi mẫu máu đến phòng thí nghiệm và xét nghiệm chúng trong vòng 8 giờ kể từ khi lấy mẫu, điều này thường không thể thực hiện được và ngăn cản việc xác nhận xét nghiệm.
Phát hiện hai chất phụ gia trong máu giúp kéo dài tuổi thọ của mẫu máu lên 48 giờ. Hiện nay có thể gửi mẫu từ hầu hết các nơi ở Úc đến phòng thí nghiệm để kịp thời tiến hành xét nghiệm. Hiện cần phải nghiên cứu bổ sung để tìm ra cách thực hiện thử nghiệm cụ thể hơn, vì một số cừu không bị nhiễm w88.is sẽ phản ứng và điều này sẽ được thực hiện trong dự án P.PSH.0576, với mục tiêu xác nhận quy trình mới trong vòng đời của dự án đó. Các xét nghiệm phát hiện gamma interferon mang lại khả năng phát hiện nhiều động vật bị nhiễm w88.is hơn ở giai đoạn sớm của w88.is so với ELISA kháng thể hoặc phát hiện trực tiếp Mptb trong phân. Điều này có thể tạo cơ hội cho các chiến lược kiểm soát nhằm loại bỏ những con non bị nhiễm w88.is trước khi chúng bắt đầu thải vi khuẩn ra môi trường. Mô hình lây nhiễm thử nghiệm Từ chương trình nghiên cứu cơ bản, một phương pháp đã được chứng minh là tạo ra w88.is Johne ở trứng thử nghiệm trong một đàn trong điều kiện được kiểm soát chặt chẽ, dẫn đến kết quả thực tế và tự nhiên.
Phương pháp tiếp cận này sẽ vô giá đối với các nghiên cứu phát triển vắc xin và thử nghiệm chẩn đoán và đã được các nhà nghiên cứu ở nước ngoài áp dụng. Chúng tôi hy vọng rằng các nhà sản xuất Úc sẽ được hưởng lợi từ các nghiên cứu hợp tác quốc tế như vậy. Khai thác bộ gen của Mptb để kiểm tra tốt hơn Cũng trong chương trình nghiên cứu cơ bản, các phương pháp dựa trên máy tính đã được sử dụng để khai thác trình tự DNA của vi khuẩn gây w88.is Mycobacteria paratuberculosis (Mptb) nhằm xác định các thành phần mới đưa vào các xét nghiệm chẩn đoán trong tương lai với mục tiêu có độ chính xác cao hơn các xét nghiệm hiện tại. Mptb không được tìm thấy thường xuyên trong máu. Điều này cho thấy rằng Mptb không lưu hành thường xuyên trong máu ở mức có thể phát hiện được. Điều này có ý nghĩa rất lớn đối với việc chẩn đoán và có ý nghĩa tích cực đối với sức khỏe cộng đồng.
Tế bào tăng sinh để phát hiện phơi nhiễm Mptb
Khả năng ghi nhớ tiếp xúc với Mptb của các tế bào bạch cầu đã được thử nghiệm trong một thử nghiệm tăng sinh ở cừu bị nhiễm w88.is trong thực nghiệm. Phản ứng ở nhóm đối chứng không phơi nhiễm vẫn ở mức thấp trong khi phản ứng này tăng lên và vẫn ở mức cao ở cừu bị phơi nhiễm. Hơn nữa, phản ứng tăng sinh thay đổi tùy theo tình trạng w88.is và có thể dự đoán tình trạng kháng thuốc. Cơ chế tiến triển của w88.is và giảm cân ở w88.is OJD Cuối cùng, lời giải thích cho hiện tượng giảm cân xảy ra ở w88.is Johne ở trứng có thể đã được tìm ra chứ không phải là tình trạng kém hấp thu ở ruột, có thể là do thiếu hụt axit amin do nhiễm trùng. Nồng độ axit amin tryptophan trong máu đã giảm mạnh khi w88.is Johne ở buồng trứng phát triển, và điều này là do vi khuẩn mycobacteria đã chơi một trò lừa để khiến cừu tiêu diệt tryptophan của chính nó. Nghiên cứu sâu hơn sẽ được tiến hành trên những khám phá cơ bản này để tối đa hóa tiềm năng của chúng.
