Tóm tắt
Việc chẩn đoán bệnh Johne ở bò vẫn còn là một vấn đề vì cho đến gần đây có rất ít w88 moi nhat cơ bản được thực hiện ở bất kỳ đâu trên thế giới và hầu hết kiến thức hiện nay đều dựa trên w88 moi nhat về bệnh lao ở người từ đầu những năm 1900. Các ứng dụng thực tế của điều này bao gồm các xét nghiệm được sử dụng ngày nay: nuôi cấy, mô bệnh học và xét nghiệm da trong da, hiện tại không có xét nghiệm nào rất nhạy cảm. Việc thiếu kiến thức cơ bản đã hạn chế nghiêm trọng việc phát triển các xét nghiệm chẩn đoán và vắc xin mới. Do đó, dự án này bao gồm các thành phần của w88 moi nhat cơ bản cũng như w88 moi nhat chuyển giao nhằm cung cấp các công cụ thực tế cho ngành trong thời gian tới.
Dự án này được thiết kế để sử dụng w88 moi nhat cơ bản và kết hợp nó với các yếu tố chiến lược để khám phá các lựa chọn thử nghiệm mới và cải thiện các thử nghiệm hiện có. Dự án sử dụng các phương pháp tiên tiến về vi sinh, miễn dịch học, sinh học phân tử và gen trong một nhóm đa ngành với sự hợp tác quốc tế để đạt được mục tiêu của mình. Các kết quả chính Nhờ kết quả của dự án, hiện nay người ta đã biết rằng: xét nghiệm gamma interferon có thể được cải thiện và áp dụng thực tế để sử dụng trên gia súc ở Úc, nhưng cần có các kháng nguyên cụ thể để có được phân có độ đặc hiệu đầy đủ có thể được kiểm tra nhanh chóng và chính xác bằng cách sử dụng phương pháp ức chế miễn dịch PCR trực tiếp và giảm cân trong bệnh Johne ở bò có thể được giải thích bằng rối loạn chuyển hóa axit amin (tryptophan) kháng thể mới và Các xét nghiệm dựa trên cytokine trong máu dường như có những hạn chế. Xét nghiệm máu dựa trên sự tăng sinh tế bào có thể dự đoán sự lây nhiễm ở gia súc. Có thể tái tạo bệnh ở dạng tự nhiên trong tình huống thí nghiệm được kiểm soát, mở ra các lựa chọn để đánh giá xét nghiệm, phát triển vắc xin và các w88 moi nhat khác. Các w88 moi nhat về biểu hiện gen có thể tiết lộ các đặc điểm vượt trội của phản ứng miễn dịch sớm, mở ra những con đường mới cho w88 moi nhat về chẩn đoán và phòng ngừa.
Mục tiêu xa hơn của dự án là đảm bảo rằng có một nhóm các nhà w88 moi nhat đáng tin cậy sẵn sàng hỗ trợ các nhà chăn nuôi bò thịt Úc và điều này cũng đã đạt được. Một số phát hiện của dự án này đã được công bố và nhóm dự án đã có danh tiếng quốc tế. Kết quả của dự án là giờ đây rõ ràng rằng một xét nghiệm chẩn đoán có những hạn chế nghiêm trọng về mặt thực tế và kỹ thuật có thể được cải thiện và có thể mang lại lợi ích đáng kể trong tương lai gần. Đây là xét nghiệm PCR phân trực tiếp có thể cung cấp kết quả cho người chăn nuôi trong vòng vài ngày thay vì 3 tháng nuôi cấy như hiện nay.
Ngoài ra, có một số xét nghiệm chức năng miễn dịch ở cấp độ w88 moi nhat mới cần được phát triển thêm. Xét nghiệm PCR phân trực tiếp Xét nghiệm PCR phân trực tiếp sẽ là bước đột phá cho ngành chăn nuôi bò thịt. Trước đây, các mẫu phân được thu thập, gửi đến phòng thí nghiệm và phải mất 3 tháng mới có thể xác nhận kết quả xét nghiệm âm tính. Đối với việc bán gia súc, điều này có nghĩa là phải lập kế hoạch trước đáng kể và gây bất tiện lớn cho người sản xuất. Khi nuôi cấy được sử dụng để xác nhận nghi ngờ nhiễm trùng đàn, ví dụ sau khi có kết quả xét nghiệm ELISA dương tính hoặc nghi ngờ, việc trì hoãn kéo dài đã gây thêm lo lắng đáng kể cho người chăn nuôi. Thử nghiệm mới khắc phục được những vấn đề này vì nó có thể cho kết quả trong vòng vài ngày kể từ khi nhận được mẫu tại phòng thí nghiệm. Nó sẽ không tốn kém gì ngoài văn hóa.
Hơn nữa, phương pháp này còn phù hợp để xét nghiệm các mẫu phân gộp, cho phép thực hiện một phương pháp xét nghiệm đàn rẻ tiền, để phát hiện sự lây nhiễm hoặc để chứng minh rằng nó không có trong đàn trong Chương trình Đảm bảo Thị trường. Thử nghiệm cũng sẽ phù hợp để thử nghiệm môi trường. Nhóm cố vấn w88 moi nhat JD khuyến nghị xác nhận bổ sung thử nghiệm này để đưa ra ước tính tốt hơn về độ nhạy và độ đặc hiệu. Điều này là do chỉ có một số lượng nhỏ mẫu có chất lượng phù hợp từ các đàn bị nhiễm bệnh và rất ít mẫu nuôi cấy dương tính, mặc dù đã nỗ lực thích hợp để có được những mẫu này.
Một phát hiện bất ngờ của w88 moi nhat là yêu cầu các mẫu phân phải được bảo quản ở -80C trước khi tiến hành PCR nhiều mẫu lấy từ đàn bị nhiễm bệnh đã không được bảo quản thích hợp tại phòng thí nghiệm thương mại. Yêu cầu tài trợ để có được các mẫu thích hợp đã được gửi tới MLA; các mẫu phân sẽ được lấy từ đàn bò thuộc Chương trình Hỗ trợ Tài chính Phi Tài chính ở Tasmania, nơi có tỷ lệ lò phản ứng ELISA cao. Dữ liệu cuối cùng sẽ được đệ trình lên Tiểu ban về Tiêu chuẩn Phòng thí nghiệm Thú y (SCAHLS) để phê duyệt sử dụng xét nghiệm trong Chương trình Bệnh Johne Quốc gia vào cuối năm 2011. Các xét nghiệm gamma interferon máu toàn phần và các xét nghiệm tăng sinh tế bào lympho Một xét nghiệm gamma interferon máu toàn phần đã được phát triển đến giai đoạn nguyên mẫu để phát hiện OJD trong một dự án trước đó đã được sửa đổi cho gia súc trong dự án này. Trước đây, cần phải gửi mẫu máu đến phòng thí nghiệm và kiểm tra chúng trong vòng 8 giờ kể từ khi lấy mẫu, điều này thường không thể thực hiện được.
Hai chất phụ gia trong máu đã được thử nghiệm để kéo dài tuổi thọ của mẫu máu lên 48 giờ. Điều này sẽ giúp có thể gửi mẫu từ hầu hết các nơi ở Úc đến phòng thí nghiệm kịp thời để tiến hành thử nghiệm. The additive may have worked, but there was concomitant loss of specificity. Hiện cần phải w88 moi nhat bổ sung để tìm ra cách thực hiện thử nghiệm cụ thể hơn và điều này sẽ được thực hiện trong dự án P.PSH.0576, với mục tiêu xác nhận quy trình mới trong vòng đời của dự án đó. Các xét nghiệm phát hiện gamma interferon mang lại khả năng phát hiện nhiều động vật bị nhiễm bệnh hơn ở giai đoạn sớm của bệnh so với ELISA kháng thể hoặc phát hiện trực tiếp Mptb trong phân. Điều này có thể tạo cơ hội cho các chiến lược kiểm soát nhằm loại bỏ những con non bị nhiễm bệnh trước khi chúng bắt đầu thải vi khuẩn ra môi trường.
Cũng trong chương trình w88 moi nhat cơ bản, khả năng ghi nhớ tiếp xúc với Mptb của các tế bào bạch cầu đã được thử nghiệm trong một xét nghiệm tăng sinh ở gia súc bị nhiễm bệnh trong thí nghiệm đáng chú ý là phản ứng ở các đối chứng không phơi nhiễm vẫn ở mức thấp trong khi phản ứng này tăng lên và duy trì ở mức cao ở gia súc bị phơi nhiễm. w88 moi nhat biểu hiện gen Các w88 moi nhat biểu hiện gen ở gia súc bị nhiễm bệnh trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng cho thấy một mô hình điều hòa đáng chú ý của các gen chịu trách nhiệm xử lý miễn dịch. Con đường này đã được khám phá mà trước đây không bị nghi ngờ là có vai trò lớn trong sự phát triển ban đầu của bệnh Johne. Kiến thức mới này sẽ được áp dụng trong một dự án trong tương lai.
Cơ chế tiến triển của bệnh
Có thể đã tìm thấy một yếu tố góp phần làm giảm cân xảy ra ở bệnh Johne ở bò, ngoài tình trạng kém hấp thu ở ruột và tiêu chảy, sự thiếu hụt axit amin do nhiễm trùng có thể góp phần gây lãng phí. Nồng độ axit amin tryptophan trong máu đã giảm mạnh khi bệnh Johne phát triển trên mô hình cừu. Biểu hiện của enzyme phân hủy axit amin này được chứng minh là tăng cao trong máu của gia súc tiếp xúc với Mptb. Điều này liên quan đến việc vi khuẩn mycobacteria thao túng vật chủ, khiến bò phá hủy tryptophan của chính nó và tác động đến cách thức hoạt động của hệ thống miễn dịch của động vật. w88 moi nhat sâu hơn sẽ được tiến hành trên những khám phá cơ bản này để tối đa hóa tiềm năng của chúng. Mô hình lây nhiễm thử nghiệm mới Từ chương trình w88 moi nhat cơ bản, một phương pháp đã được chứng minh là tạo ra bệnh Johne ở bò thử nghiệm trong một đàn trong điều kiện được kiểm soát chặt chẽ, mang lại kết quả thực tế và tự nhiên. Sinh thiết ruột bằng phẫu thuật hai lần đã xác nhận rằng các con vật đã bị nhiễm bệnh, đang phát triển bệnh Johne ở các mức độ khác nhau và không bị nhiễm trùng nghiêm trọng một cách phi thực tế vốn rất phổ biến trong các w88 moi nhat ở nước ngoài. Cách tiếp cận này sẽ vô giá đối với các w88 moi nhat phát triển vắc xin và xét nghiệm chẩn đoán và đã được các nhà w88 moi nhat nước ngoài áp dụng. Chúng tôi hy vọng rằng các nhà sản xuất Úc sẽ được hưởng lợi từ các w88 moi nhat hợp tác quốc tế như vậy.