Tóm tắt
Mặc dù vai trò của enzyme protease thường được coi là cơ bản đối với quá trình làm mềm sau khi giết mổ, nhưng vai trò của sự khác biệt về tính nhạy cảm của chất nền đối với hoạt động của protease trước đây chưa được xem xét trong khoa học về w88.is. Trong tài liệu nghiên cứu sinh lý học, sự khác biệt về tốc độ thoái biến của protein tế bào được công nhận là bị ảnh hưởng bởi sự biến tính protein và các biến đổi sau dịch mã như quá trình phosphoryl hóa và glycosyl hóa.
Nhà cung cấp dịch vụ, Carne, đã phát triển một phương pháp đo độ nhạy cảm với chất nền trong chất đồng nhất của w88.is. Phương pháp này dựa trên việc đo tổng hoạt tính protease tại chỗ bằng cách sử dụng chất nền đặc hiệu calpain huỳnh quang (CalS1). Để đo độ nhạy cảm với protein, CalS1 đã được thêm vào chất đồng nhất ở hai nồng độ: nồng độ CalS1 đầu tiên được sử dụng vượt quá, xác định tổng hoạt tính calpain trong mẫu.
Phương pháp thứ hai sử dụng nồng độ không đổi nhưng ở mức dưới mức tối đa, tạo điều kiện cạnh tranh cho enzyme: nếu ái lực với cơ chất nội sinh cao thì tốc độ phân hủy CalS1 sẽ giảm so với điều kiện có ái lực với cơ chất nội sinh thấp. Một cuộc điều tra trước đây về xét nghiệm này đã xác định rằng, trong các mẫu được đo ở trạng thái chết hoặc ở trạng thái cứng, xét nghiệm độ nhạy cảm với cơ chất có mối tương quan cao với tốc độ làm mềm trong các mẫu và những kết quả này cung cấp bằng chứng cho một số nghiên cứu sâu hơn về các cơ chế cơ bản chịu trách nhiệm về sự khác biệt về tính nhạy cảm.
Trong nghiên cứu này, Carne đã nghiên cứu ảnh hưởng của các nhiệt độ trước cứng khác nhau đến tính nhạy cảm của cơ chất: nhiệt độ trước cứng cao được biết là gây ra sự biến tính của cả sợi cơ và protein tế bào chất hòa tan, và những tác động này có thể được cho là sẽ gây ra những thay đổi về tính nhạy cảm của sợi cơ. Ngoài sự biến tính, những thay đổi về tính nhạy cảm có thể xảy ra trong thời kỳ lão hóa. Lý do có thể dẫn đến những thay đổi như vậy là do sự thoái hóa của protein cơ chất, điều này có thể được cho là sẽ làm giảm tính nhạy cảm khi tổng số vị trí gắn kết giảm.
Ngoài ra, khi số lượng sản phẩm phân hủy tăng lên (và nhiều sản phẩm phân hủy protein sợi cơ có thể hòa tan) khả năng nhạy cảm có thể tăng lên khi có nhiều vị trí gắn kết hơn. Từ kết quả của giai đoạn hiện tại, có vẻ như không chỉ riêng hoạt động calpain có thể giải thích được độ dai cuối cùng tăng lên của w88.is được ủ ở nhiệt độ cao trong giai đoạn tiền đông cứng.
Tuy nhiên, xét nghiệm hiện tại dường như cung cấp một dấu hiệu bổ sung cho w88.is đã trải qua các điều kiện biến tính dẫn đến độ dai tăng lên. Kết luận chung của công việc này là:
Mức độ phosphoryl hóa trong sợi cơ và phần nổi phía trên của mô cơ khác nhau giữa các loài động vật. Sự khác biệt này được thể hiện rõ ràng cả ở mẫu giết chết và mẫu sau nghiêm ngặt.
Mặc dù số lượng thử nghiệm nhỏ và việc so sánh không đạt được ý nghĩa thống kê, nhưng kết quả cho thấy rằng mức độ phosphoryl hóa trong các phần sợi cơ và phần nổi phía trên cung cấp các dấu hiệu tiềm năng cho độ nhạy cảm
Những kết quả này, nếu được xác nhận, sẽ hỗ trợ cho kết quả thao tác trong ống nghiệm của quá trình phosphoryl hóa protein cơ, với những tác động đã được chứng minh đối với hoạt động của calpain.