Tóm tắt
Dự án này được thiết kế để xác định xem các tài sản bị nhiễm w88 Johne ở trứng (OJD) có thể được xác định bằng cách giám sát thường xuyên những con cừu bị loại tại lò mổ để phát hiện các tổn thương của OJD hay sự hiện diện của Mycobacteria avium subsp. w88 paratuberculosis.
Ba mươi lăm dòng cừu đáp ứng các tiêu chí xác định trước để đưa vào thử nghiệm được lấy từ 17 đàn cừu bị nhiễm w88 đã biết (trung bình dòng 330, trong khoảng từ 50 đến 683). Các tiêu chí được thiết kế để đảm bảo rằng tất cả các dòng thử nghiệm đều bị nhiễm OJD. Trong hầu hết các trường hợp, các dòng thử nghiệm có thể đã bị nhiễm w88 nặng. Trong khoảng thời gian sáu tháng, những dây chuyền thử nghiệm này đã được chuyển đến các lò mổ trên khắp New South Wales để giết mổ, hầu hết được chuyển đến hai cơ sở xuất khẩu lớn. Một dòng đã bị giết ở Victoria.
Các thanh tra viên được đào tạo có mặt tại các lò mổ để kiểm tra không ít hơn 50% và lên đến 95% nội tạng bụng của tất cả các dòng cừu trưởng thành bị giết mổ trong mỗi ca giết mổ (khoảng 10 đến 15 dòng mỗi ca tại hai lò mổ xuất khẩu lớn). Khi quan sát thấy các tổn thương gợi ý đến OJD, các mẫu mô cố định được lấy để xác nhận mô w88 học từ tối đa ba con cừu nghi ngờ trong mỗi dòng nghi ngờ. Các thanh tra viên không được biết danh tính của các dây chuyền thử nghiệm, nhưng biết rằng có một dây chuyền thử nghiệm sẽ bị tiêu diệt trong ca làm việc cụ thể.
Các thanh tra viên đã phát hiện các tổn thương nặng gợi ý w88 OJD ở 34 (97%) trong số 35 dòng thử nghiệm đủ điều kiện. Dòng thử nghiệm duy nhất mà các tổn thương không được các thanh tra viên phát hiện là dòng cừu cái lai được đưa vào khi trưởng thành tại một trang trại mà OJD chỉ được báo cáo với tỷ lệ lưu hành thấp ở merinos. Chẩn đoán tổn thương vi thể (31 vạch hoặc 91%) hoặc gợi ý (3 vạch hoặc 9%) của OJD đã được xác định trong tất cả 34 dòng được phát hiện bởi các thanh tra viên. Tỷ lệ trung bình của cừu trong 34 dòng này có tổn thương nặng gợi ý w88 OJD theo báo cáo của thanh tra viên là 21% (phạm vi<1% to>90%).
Các vòng buộc của đoạn cuối hồi tràng cũng được lấy từ 10 con cừu được chọn ngẫu nhiên trong mỗi dòng cừu bị giết trong ca nuôi cấy gộp ruột (PIC). Ngoài 9 dòng được chọn tại lò mổ làm đối chứng âm tính trên cơ sở những dòng này có nguồn gốc từ các khu vực không được biết là bị nhiễm w88 OJD, tất cả các mẫu ruột từ các dòng không thử nghiệm đều bị loại bỏ khi phòng thí nghiệm tiếp nhận.
Đối với các dòng thử nghiệm và đối chứng được thử nghiệm, niêm mạc được cạo từ khoảng 25 cm vuông của mỗi vòng trong số 10 vòng buộc của đoạn cuối hồi tràng sau khi mở bằng kỹ thuật vô trùng. Các mảnh vụn gộp lại từ mỗi dòng được gửi đi nuôi cấy trong ruột bằng phương pháp BACTEC, với các mẫu nuôi cấy dương tính được thực hiện PCR và REA đối với trình tự IS900 của M. ptb.
Trong số 33 kết quả nuôi cấy có được từ 35 dòng thử nghiệm, 19 (58%) dương tính với M. ptb và 14 (42%) âm tính. Dòng lai được mô tả ở trên trong đó không có tổn thương rõ ràng nào của w88 OJD được người kiểm tra phát hiện là dương tính trên PIC. PIC phát hiện dương tính với OJD chỉ 18 (53%) trong số 34 dòng được phát hiện bằng kiểm tra trực quan và mô w88 học.
The apparent lower sensitivity of PIC in this trial may simply reflect the small random sample (10) of sheep in the PIC method used in comparison to the larger sample examined visually (>200 con cừu trong hầu hết các dòng thử nghiệm), thay vì độ nhạy thấp hơn của phương pháp nuôi cấy.
Năm dòng cừu thu được từ các khu vực bị nhiễm w88 đã bị loại khỏi thử nghiệm dựa trên thông tin dịch tễ học sau này cho thấy chúng không đáp ứng các tiêu chí lựa chọn. Tất cả những dòng này đều âm tính về cả mô w88 học và nuôi cấy.
Đối với 7 trong số 9 dòng đối chứng âm tính (từ các tài sản không được biết là bị nhiễm OJD), không phát hiện thấy tổn thương nào của OJD. Tuy nhiên, ở 2 trong số 9 dòng đối chứng, các thanh tra viên đã báo cáo 2% và 4% số cừu có các tổn thương nghi ngờ, nhưng tất cả các mẫu mô cố định được gửi từ các dòng này đều âm tính về mô w88 học.
Tuy nhiên, kết quả PIC dương tính thu được từ 2 trong số 7 dòng đối chứng trong đó không phát hiện thấy tổn thương rõ ràng nào, một dòng từ khu vực phía Tây NSW nơi OJD chưa được báo cáo cho đến nay, dòng còn lại từ khu vực mà OJD chưa được báo cáo vào thời điểm đó. Liệu những kết quả PIC dương tính này có phải là do nhiễm trùng đàn thực sự hay do ô nhiễm môi trường tạm thời của cừu bị loại trong quá trình vận chuyển hoặc nhốt trong lò mổ hay không là điều không chắc chắn.
Kết quả của thử nghiệm này cho thấy rằng việc giám sát bằng hình ảnh và xúc giác đối với nội tạng của cừu loại khi giết mổ để phát hiện các tổn thương gợi ý w88 Johne ở buồng trứng là một chiến lược có độ nhạy cao và đáng tin cậy để phát hiện các đàn bị nhiễm OJD đang xảy ra tử vong do OJD.
The estimated 95% confidence intervals of 91.5% and 100% for the sensitivity estimate of 97% obtained from these data suggest a practical working estimate of the sensitivity of visual/tactile examination of viscera for lesions suggestive of OJD in lines of >300 con cừu trưởng thành làm xét nghiệm sàng lọc để chọn mẫu cho xét nghiệm mô w88 học xác định sẽ là 90% đối với bất kỳ quần thể cừu nào mà OJD đã được công nhận trong nhiều năm.
Tuy nhiên, liệu kỹ thuật sàng lọc lò mổ này có đủ nhạy để phát hiện thường xuyên các đàn gần đây bị nhiễm OJD hay các đàn có tỷ lệ nhiễm bệnh thấp kéo dài hay không thì chưa chắc chắn.1%>
