Tóm tắt
Bốn chủng vi khuẩn dạ cỏ Butyrivibrio fibrisolvens biến đổi gen đã được tiêm vào dạ cỏ của hai con cừu (T 1 & T2). Tất cả bốn chủng vi khuẩn đã được chứng minh là có khả năng sản xuất enzyme giải độc: w88 moi nhat dehalogenase với hoạt tính trong khoảng 10 - 20nmol w88 moi nhat/minlmg protein vi khuẩn. Để so sánh trực tiếp độ nhạy cảm với chất độc, hai con cừu chưa được tiêm chủng được sử dụng làm động vật "đối chứng" (CI & C2). Trong tuần trước khi kiểm tra độc tính, các mẫu dạ cỏ được lấy hàng ngày từ cả bốn con cừu và phân tích để đo số lượng vi khuẩn chứa gen giải độc.
Ngay trước cuộc thử nghiệm, cừu được tiêm chủng cho thấy mức độ khoảng 107 (Tl) và 106 (T2) vi khuẩn biến đổi trên mỗi mililit dịch dạ cỏ, trong khi C 1 và C2 không chứa vi khuẩn tái tổ hợp. Cừu được cân một ngày trước thí nghiệm đầu độc và liều lượng được điều chỉnh cho từng con vật, để đảm bảo rằng mỗi con nhận được một lượng chất độc cụ thể tính trên mỗi kg trọng lượng cơ thể. Bốn con cừu được cho ăn một loạt liều nhỏ w88 moi nhat trong khoảng thời gian ba ngày, với tổng lượng được tính là liều gây chết người trung bình. Chúng được phép phục hồi trong 3 ngày và sau đó được cho ăn liều lặp lại vào ngày hôm sau.
w88 moi nhat được cho ăn với nhiều liều lượng nhỏ để cho phép quan sát bất kỳ sự khác biệt đáng kể nào giữa cừu thử nghiệm và cừu đối chứng. Trong ngày thứ 2, cả cừu đối chứng đều biểu hiện các triệu chứng điển hình của ngộ độc w88 moi nhat cấp tính. Cả hai đều vô cùng lo lắng, thậm chí phản ứng với những tiếng động quen thuộc bằng phản ứng hoảng loạn. Trong vài giờ vào ngày thứ 2, cả hai con cừu đối chứng đều phải được kiềm chế để không bị lỏng lẻo và có thể gây thương tích cho bản thân. Cả hai con cừu thử nghiệm vẫn bình tĩnh trong suốt thời gian này, nhưng có một số dấu hiệu sinh lý của tình trạng nhiễm độc mãn tính (nhịp tim và nhịp hô hấp tăng) trong I - 2 giờ.
Vào ngày thứ 3, cừu đối chứng vẫn rất lo lắng và nhiều lần lại phải kiềm chế thể chất. Tuy nhiên, cừu thử nghiệm không có triệu chứng ngộ độc w88 moi nhat vào ngày thứ 3. Trong giai đoạn ngộ độc lớn thứ hai (ngày 7), cừu đối chứng lại tỏ ra lo lắng tột độ và có những giai đoạn hoảng sợ. Những con cừu thử nghiệm vẫn bình tĩnh, chỉ có sự gia tăng nhỏ về mức độ cảnh giác với những tiếng động đột ngột. Vào khoảng 5 giờ sáng ngày thứ 8, con cừu đối chứng không chịu nổi ngộ độc cấp tính, trải qua phản ứng hoảng loạn, thoát ra khỏi thùng trao đổi chất nơi chúng được nhốt và chết. Lúc 8h53, cừu thử nghiệm T2 chết mà không bị co thắt cơ hay thần kinh. Khám nghiệm tử thi cho thấy cái chết là do phù phổi (có chất lỏng trong phổi) điển hình của ngộ độc w88 moi nhat mãn tính. Vào lúc 9:00 sáng, cừu thử nghiệm TI bị ảnh hưởng rõ rệt bởi chất độc, với nhịp tim tăng nhẹ (130 nhịp/phút) và nhịp thở (30 nhịp/phút). Đây là mức cao hơn khoảng 50% so với mức nghỉ ngơi bình thường. Trong vòng 4 giờ, cả hai đều trở lại bình thường và Tl có vẻ không bị căng thẳng.
Kết luận là cừu thử nghiệm có khả năng chống nhiễm độc w88 moi nhat cao hơn đáng kể so với cừu đối chứng. Giữa hai con cừu thử nghiệm, TI cho thấy mức độ vi khuẩn giải độc cao hơn T2 khi bắt đầu thí nghiệm. TI cũng cho thấy lớn hơn. kháng độc tố tốt hơn T2. Những kết quả này rất đáng khích lệ nhưng cần phải được kiểm tra lại trong một thí nghiệm lặp lại trước khi có thể đưa ra kết luận chắc chắn về tác dụng bảo vệ của vi khuẩn.
